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技術文章

進口實時熒光定量pcr熒光通道哪里不同

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以下是對不同進口實時熒光定量 PCR 儀熒光通道方面的對比分析:


一、常見品牌及熒光通道數量

1、羅氏 LightCycler 系列:通常具備多個熒光通道,比如有的型號有 4 - 6 個通道,可滿足同時檢測多種不同熒光標記的熒光基團,像常見的 FAM、VIC、CY5 等,能在單次實驗中實現對多個目標基因的并行檢測。

2、賽默飛 QuantStudio 系列:有多種配置可選,一般涵蓋 3 - 5 個熒光通道,不同通道適配不同的熒光染料,方便靈活開展多基因定量分析等實驗,通道的檢測靈敏度較高,可精準捕捉熒光信號變化。

3、伯樂 CFX 系列:通常配備 4 - 5 個熒光通道,其通道在波長選擇等方面進行了優化,能夠較好地區分不同熒光染料發射的信號,對于一些近紅外等特定波段的熒光檢測也有不錯的表現,利于復雜樣本中多靶標檢測。


二、通道波長范圍及適用性

1、羅氏 LightCycler 系列:其熒光通道的波長范圍較廣,例如對于激發波長覆蓋從可見光到近紅外區域的多個波段,能適配市面上大多數常用的熒光染料,無論是用于核酸定量檢測,還是基于熒光探針的基因分型等實驗,都可以找到合適的通道及對應的染料組合來實現準確檢測。

2、賽默飛 QuantStudio 系列:各通道有著精準的波長設定,激發波長和發射波長的范圍經過優化后,對于一些新型的、具有更窄發射光譜的熒光染料有很好的兼容性,這使得在開展一些高靈敏度、高特異性要求的科研項目,比如稀有突變基因檢測時,可以選擇更合適的熒光染料通過對應通道進行檢測。

3、伯樂 CFX 系列:波長范圍針對性強,特別是在一些適合生物樣本自身熒光背景下能突出目標熒光信號的波段有較好配置,比如在檢測一些本身帶有一定雜質熒光干擾的臨床樣本核酸時,通過合理選擇通道對應的熒光染料,能有效降低背景干擾,提高檢測的準確性和可靠性。


三、通道間的串擾情況

1、羅氏 LightCycler 系列:在儀器設計和光學系統優化方面下了功夫,通道間的串擾程度較低,通過先進的濾光片等光學組件,能夠很好地將不同通道對應的熒光信號進行區分,使得檢測數據更加準確,避免了因串擾導致的假陽性或假陰性結果,在多通道同時檢測復雜樣本時優勢明顯。

2、賽默飛 QuantStudio 系列:采用了高精度的光學隔離技術等手段來降低通道串擾,各通道的熒光信號獨立性強,哪怕是同時檢測多個熒光信號強度相近的目標基因,也能清晰準確地分辨出每個通道對應的信號,保障了定量分析的精度,尤其適用于需要精確對比不同基因表達量差異的實驗。

3、伯樂 CFX 系列:同樣注重解決通道串擾問題,其光路設計和信號處理算法,使得通道間串擾得到有效控制,在進行熒光染料組合較為復雜、多通道長時間連續檢測的情況下,依然可以維持穩定且準確的檢測結果,對于高通量的熒光定量 PCR 檢測需求能夠較好地滿足。


四、熒光通道的靈敏度差異

1、羅氏 LightCycler 系列:整體熒光通道靈敏度表現出色,對于低濃度的核酸模板,能夠通過靈敏的熒光信號捕捉和放大系統,準確檢測到熒光信號的變化,實現對微量核酸的定量分析,在一些病原體早期檢測等對靈敏度要求高的應用場景中能發揮很好的作用。

2、賽默飛 QuantStudio 系列:以高靈敏度為特點之一,其熒光通道結合先進的光電檢測元件,對于微弱的熒光信號變化感知敏銳,在檢測單拷貝基因或者低豐度轉錄本等實驗中,可以提供可靠的數據,而且不同通道的靈敏度一致性較好,確保多通道檢測時結果的均衡性。

3、伯樂 CFX 系列:在靈敏度方面也有良好表現,尤其是對一些熒光衰減較快或者本身熒光強度相對不高的染料,其通道能夠有效地收集和檢測信號,在實時監測熒光信號動態變化的過程中,能精準捕捉到關鍵的信號轉折點等信息,有助于準確進行定量分析和熔解曲線分析等操作。


不同進口實時熒光定量 PCR 儀的熒光通道在數量、波長范圍、串擾情況以及靈敏度等方面各有特點,用戶需要根據自身的實際實驗需求,如檢測的基因數量、樣本類型、對靈敏度的要求等因素綜合選擇合適的儀器。

TEL:18016231680

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